一種基于人工模擬核酸技術(shù)的增效PCR法富集DNA目標(biāo)區(qū)域的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910029916.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN111424077A 公開(kāi)（公告）日 2020-07-17
申請(qǐng)公布號(hào) CN111424077A 申請(qǐng)公布日 2020-07-17
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6876;C12Q1/6806 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 葛猛;余倩;夏霞宇;王宏偉 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 北京旌準(zhǔn)醫(yī)療科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京福安華生物科技有限公司;葛猛
地址 100071 北京市豐臺(tái)區(qū)海鷹路6號(hào)院31號(hào)中金環(huán)球大廈三層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種基于人工模擬核酸技術(shù)的增效PCR法富集DNA目標(biāo)區(qū)域的技術(shù)。本發(fā)明保護(hù)由內(nèi)側(cè)引物對(duì)和外側(cè)引物對(duì)組成的特異引物組；內(nèi)側(cè)上游引物包括區(qū)段Ⅰ和區(qū)段Ⅱ，內(nèi)側(cè)下游引物包括區(qū)段Ⅲ和區(qū)段Ⅳ；區(qū)段Ⅱ和區(qū)段Ⅳ針對(duì)某一靶序列；外側(cè)上游引物和外側(cè)下游引物中均具有非天然核苷酸。本發(fā)明還保護(hù)一種富集靶序列的方法：以含有靶序列的DNA為模板，采用特異引物組進(jìn)行PCR擴(kuò)增；PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系中具有配對(duì)脫氧核苷酸。本發(fā)明在增效PCR中的基礎(chǔ)上，引入非天然堿基對(duì)尾巴引物設(shè)計(jì)，可以有效避免非特異擴(kuò)增以及引物二聚體形成，能夠極大的降低各種背景干擾，擴(kuò)增效果近乎完美。本發(fā)明在大規(guī)模平行測(cè)序領(lǐng)域有很大的應(yīng)用前景。