胰蛋白酶親和層析純化人重組SPINK6蛋白的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201110369066.4 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN103122028B 公開（公告）日 2016-03-30
申請(qǐng)公布號(hào) CN103122028B 申請(qǐng)公布日 2016-03-30
分類號(hào) C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 黃晉江;趙曉蔚;陸海榮;黃青山 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 復(fù)旦大學(xué);上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司
地址 200433 上海市楊浦區(qū)邯鄲路220號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種人重組SPINK6蛋白的親和層析純化方法，其包括：將胰蛋白酶與親和層析介質(zhì)混合，偶聯(lián)反應(yīng)，制得胰蛋白酶親和層析介質(zhì)；將人重組SPINK6蛋白通過預(yù)先用緩沖液A平衡好的裝有所述的胰蛋白酶親和層析介質(zhì)的層析柱；然后用緩沖液A清洗上樣后的胰蛋白酶親和層析柱；再用緩沖液B將SPINK6蛋白從層析柱上洗脫，并收集洗脫峰。本發(fā)明方法獲得的人重組SPINK6蛋白的活性回收率為45-60％，純度可達(dá)90％-95％，蛋白純化倍數(shù)為10-20倍以上。本方法處理速度快、重復(fù)性好、柱效長(zhǎng)且結(jié)合效率基本不變。