腫瘤細胞中靶向性表達shRNA的真核表達載體

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200910044221.8 申請日 -
公開（公告）號 CN101993892A 公開（公告）日 2011-03-30
申請公布號 CN101993892A 申請公布日 2011-03-30
分類號 C12N15/85(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 易銀沙;呂媛;孫永林;袁炳秋 申請（專利權(quán)）人 湖南能潤醫(yī)學診斷技術(shù)股份有限公司
代理機構(gòu) 長沙正奇專利事務所有限責任公司 代理人 長沙贏潤生物技術(shù)有限公司;易銀沙;呂媛;孫永林;袁炳秋;湖南能潤醫(yī)學診斷技術(shù)股份有限公司
地址 410000 湖南省長沙市岳麓區(qū)銀盆南路315號火炬城M3組團1棟3樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種腫瘤細胞中靶向性表達shRNA的真核表達載體，包括如下結(jié)構(gòu)：1)由polII型啟動子驅(qū)動的、將熒光蛋白基因與mirshRNA結(jié)構(gòu)串聯(lián)在一起的表達框結(jié)構(gòu)；2)經(jīng)過CMV增強子和SV40增強子增強的hTERT啟動子；3)以mir30為基礎的mirshRNA結(jié)構(gòu)：mir30左臂-shRNA-mir30右臂，此mirshRNA結(jié)構(gòu)可多個串聯(lián)；4)Kan或者Amp抗性篩選標記；5)LR同源重組臂。利用本發(fā)明提供的方法構(gòu)建上述shRNA真核表達載體，能夠在腫瘤細胞中靶向性、特異性地表達單條或多條shRNA，在對腫瘤細胞進行RNA干擾、實行基因治療的同時，又不影響正常細胞，解決了利用RNA干擾進行基因治療時的非特異性干擾難題，有助于RNA干擾在腫瘤的基因治療方面的研究和應用。