用于快速篩選和鑒定有效shRNA的載體及其篩選和鑒定方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200910044738.7 申請日 -
公開（公告）號 CN102051371B 公開（公告）日 2013-11-20
申請公布號 CN102051371B 申請公布日 2013-11-20
分類號 C12N15/79(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 易銀沙;呂媛;孫永林;袁炳秋 申請（專利權）人 湖南能潤醫(yī)學診斷技術股份有限公司
代理機構 長沙正奇專利事務所有限責任公司 代理人 湖南能潤醫(yī)學診斷技術股份有限公司
地址 410013 湖南省長沙市高新區(qū)火炬城M3組團
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種快速篩選和鑒定有效shRNA真核表達載體，將如下結構構建至同一個真核表達載體上：1)由polIII型啟動子調控的shRNA表達框結構，即polIII型啟動子+shRNA插入位點；2)由CMV啟動子調控的熒光蛋白表達框，并在熒光蛋白基因后面緊跟一個多克隆位點(MCS)；3)由SV40啟動子調控的熒光蛋白表達框，該熒光蛋白的熒光顏色與第2)中的熒光蛋白的熒光顏色不同。本發(fā)明還提供了用上述載體篩選或驗證有效shRNA的方案，利用此載體和方法篩選和鑒定有效shRNA，不需做RT-PCR或Western-blot檢測，快速、簡單、方便、成本低廉，特別適合于從多個預先設計的備選shRNA中篩選有效shRNA。