一種高效表達(dá)豬瘟E2-IL1融合蛋白的重組CHO細(xì)胞株及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
基本信息
| 申請?zhí)?/td> | CN202010215284.1 | 申請日 | - |
| 公開（公告）號 | CN111304173A | 公開（公告）日 | 2020-06-19 |
| 申請公布號 | CN111304173A | 申請公布日 | 2020-06-19 |
| 分類號 | C12N5/10(2006.01)I | 分類 | - |
| 發(fā)明人 | 周佳彬;劉喜鳳;劉燕;楊闖;曹玉飛;鄭杰;馬寧寧 | 申請（專利權(quán)）人 | 浙江鼎持生物制品有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京金宏來專利代理事務(wù)所（特殊普通合伙） | 代理人 | 浙江鼎持生物制品有限公司;北京鼎持生物技術(shù)有限公司 |
| 地址 | 311800浙江省紹興市諸暨市陶朱街道環(huán)城北路368號 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種高效表達(dá)豬瘟E2?IL1融合蛋白的重組CHO細(xì)胞株及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。該重組CHO細(xì)胞株經(jīng)載有人工合成的E2?IL1基因序列的載體轉(zhuǎn)染，通過單克隆細(xì)胞篩選，獲得表達(dá)E2?IL1融合蛋白的重組細(xì)胞株；擴(kuò)大培養(yǎng)至6孔板階段即可實(shí)現(xiàn)無血清懸浮培養(yǎng)，縮短了培養(yǎng)時(shí)間，提高了表達(dá)量；用該E2?IL1融合蛋白與佐劑ISA 206 VG制成疫苗免疫仔豬能夠同時(shí)誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫，血清學(xué)檢測結(jié)果不僅能夠產(chǎn)生并檢測到針對E2的中和抗體，同時(shí)能夠在血清中檢測到較高的干擾素?γ以及能夠檢測到較強(qiáng)的淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。本發(fā)明構(gòu)建的重組CHO細(xì)胞株不僅能夠高表達(dá)E2?IL1融合蛋白，而且可以實(shí)現(xiàn)抗原蛋白的無血清、大規(guī)模、穩(wěn)定生產(chǎn)，該細(xì)胞株可以應(yīng)用于豬瘟E2亞單位疫苗的研發(fā)。?? |
