基于蛋白反式剪接的納米固定化方法、應(yīng)用及固定化酶

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210362600.7 申請日 -
公開（公告）號 CN114686467A 公開（公告）日 2022-07-01
申請公布號 CN114686467A 申請公布日 2022-07-01
分類號 C12N11/02（2006.01）I;C12N9/16（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張桂敏;周晨;盧爭輝;向臘;巫攀 申請（專利權(quán)）人 湖北大學(xué)
代理機(jī)構(gòu) 北京輕創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 -
地址 430062湖北省武漢市武昌區(qū)友誼大道368號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及基于蛋白反式剪接的納米固定化方法、應(yīng)用及固定化酶。該方法將基底蛋白的核苷酸序列和目標(biāo)蛋白的核苷酸序列與斷裂型內(nèi)含肽兩端的核苷酸序列分別連接，連接后分別進(jìn)行融合表達(dá)；將融合表達(dá)后的基底蛋白制備成酶雜化納米花，使基底蛋白被固定化；將固定化后的基底蛋白與融合表達(dá)后的目標(biāo)蛋白混合，通過斷裂型內(nèi)含肽的反式自剪接功能直接進(jìn)行特異性自組裝，使目標(biāo)蛋白被間接固定化。該方法將斷裂型內(nèi)含肽和酶雜化納米花相結(jié)合，可將目標(biāo)蛋白的純酶或者粗酶液直接與固定化的基底蛋白結(jié)合，避免對蛋白構(gòu)象的影響，高效便捷。該方法制備玉米赤霉烯酮降解的固定化酶，具有良好穩(wěn)定性、催化效率和重復(fù)利用率。