熒光探針檢測尿嘧啶-DNA糖基化酶活性的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011635433.6 申請日 -
公開（公告）號 CN112760363A 公開（公告）日 2021-05-07
申請公布號 CN112760363A 申請公布日 2021-05-07
分類號 C12Q1/686(2018.01)I 分類 -
發(fā)明人 烏拉迪斯拉夫 申請（專利權(quán)）人 諸暨加向生物科技有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 311800浙江省紹興市諸暨市陶朱街道艮塔西路138號新金融大廈612
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種熒光探針檢測尿嘧啶?DNA糖基化酶活性的方法為在實時聚合酶鏈式反應儀中混合聚合酶鏈式反應緩沖液、一個基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的熒光DNA探針、尿嘧啶?DNA?糖基化酶，將反應液在25℃?37℃培養(yǎng)30分鐘，而后在95℃加熱2分鐘，最后在25℃?37℃培養(yǎng)10分鐘，在聚合酶鏈式反應儀的熒光測量通道為波長520 nm處收集嘧啶?DNA糖基化酶活性數(shù)據(jù)；所述的基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的熒光DNA探針為FAM?GCCAACCdUGGCTCT?BHQ1，其中,FAM為熒光報告基團，BHQ1為熒光淬滅基團；所述的聚合酶鏈式反應緩沖液成份為Tris?HCl、KCl、MgCl2。具有簡單高效的技術(shù)優(yōu)點。??