單分子探針多重靶向捕獲文庫(kù)的構(gòu)建方法及應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010983954.4 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN112063690A | 公開(kāi)（公告）日 | 2020-12-11 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112063690A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-12-11 |
| 分類號(hào) | C12Q1/6806(2018.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 段小紅;張騰龍;楊春燕;楊文娟;李旋;王東亮;周啟明 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 北京求臻醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 重慶百潤(rùn)洪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 北京求臻醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司 |
| 地址 | 100000北京市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)經(jīng)海四路156號(hào)院3號(hào)樓3層301 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及分子檢測(cè)的技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及單分子探針多重靶向捕獲文庫(kù)的構(gòu)建方法及應(yīng)用；包括以下步驟：根據(jù)靶目標(biāo)區(qū)域序列設(shè)計(jì)并合成分子倒置探針；針對(duì)捕獲的目標(biāo)區(qū)域，靶序列互補(bǔ)區(qū)域探針A和靶序列互補(bǔ)區(qū)域探針B可特異性與目標(biāo)區(qū)域模板互補(bǔ)結(jié)合，形成含有一個(gè)核苷酸至幾百個(gè)核苷酸缺口的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；然后加入4種游離的核苷酸，在DNA聚合酶的作用下以靶目標(biāo)序列為模板填補(bǔ)缺口，DNA連接酶催化探針區(qū)域兩端的3’，5’?磷酸二酯鍵，形成完整的環(huán)化探針；用PCR擴(kuò)增直接產(chǎn)生靶向區(qū)域的測(cè)序文庫(kù)，此時(shí)的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物即為測(cè)序文庫(kù)。本發(fā)明在傳統(tǒng)的MIP技術(shù)基礎(chǔ)上做了優(yōu)化和改進(jìn)，用于腫瘤相關(guān)的低頻變異和甲基化的檢測(cè)。?? |
