用于高通量測序的文庫構(gòu)建方法及高通量測序方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010353791.1 申請日 -
公開（公告）號 CN111534858B 公開（公告）日 2021-07-13
申請公布號 CN111534858B 申請公布日 2021-07-13
分類號 C40B50/06;C12Q1/6869 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 司慧娟;王濤;王量;毛瑞芳 申請（專利權(quán)）人 杭州瑞普基因科技有限公司
代理機構(gòu) 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 肖陽
地址 311121 浙江省杭州市余杭區(qū)文一西路998號海創(chuàng)園12幢4樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出了用于高通量測序的文庫構(gòu)建方法，該方法包括：（1）將至少兩種DNA樣品進行步驟（1?1）至（1?4）的操作：（1?1）將DNA片段進行末端修復(fù)，以便獲得經(jīng)過末端修復(fù)的DNA片段；（1?2）在經(jīng)過末端修復(fù)的DNA片段的3’末端添加堿基A，以便獲得具有粘性末端A的DNA片段；（1?3）將具有粘性末端A的DNA片段與接頭相連，以便獲得連接產(chǎn)物；（1?4）將連接產(chǎn)物進行預(yù)擴增及純化，以便得到預(yù)擴增產(chǎn)物；（2）將至少兩種預(yù)擴增產(chǎn)物進行混合，并將得到的總預(yù)擴增產(chǎn)物與探針進行雜交捕獲，以便得到目的預(yù)擴增產(chǎn)物；（3）將目的預(yù)擴增產(chǎn)物進行擴增及純化，以便得到混合文庫。本發(fā)明的文庫構(gòu)建方法可以有效地提高建庫效率，降低建庫成本，適于規(guī)模化應(yīng)用。