一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> TW101145214 申請日 -
公開(公告)號 TW201422816A 公開(公告)日 2014-06-16
申請公布號 TW201422816A 申請公布日 2014-06-16
分類號 C12N15/67;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丘小慶 申請(專利權)人 畿晉慶三聯(lián)(北京)生物技術有限公司
代理機構 蘇騰昇 代理人 畿晉慶三聯(lián)(北京)生物技術有限公司
地址 中國大陸 CN
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明“一種高效表達工程菌重組蛋白的方法及其應用”,屬於生物制藥工程。該方法包括如下步驟:(1)重組突變質粒轉染大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌中得到陽性單克隆菌落,(2)對陽性單克隆菌落進行增菌得到種子菌液,誘導所述種子菌液大量增菌生長,(3)分離含有表達的目的重組蛋白的菌體上清液,提純菌體上清液中的重組蛋白,其特徵在於:所述大腸桿菌pET系統(tǒng)工程菌指E.coli B834(DE3)。本發(fā)明還進一步對大量增菌培養(yǎng)基的成分及蛋白質純化步驟進行了優(yōu)化,在蛋白質產(chǎn)量和純度上都得到了明顯的提高。使本發(fā)明的方法適合於應用在大腸桿菌工程菌表達重組蛋白的規(guī)?;a(chǎn)中。