一種用于檢測(cè)目的基因低頻突變的擴(kuò)增子文庫的構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710976835.4 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN107604045A 公開（公告）日 2018-01-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN107604045A 申請(qǐng)公布日 2018-01-19
分類號(hào) C12Q1/6806;C40B50/06;C40B40/06 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄭喬松;師曉;陳敏;張凱華;國(guó)曉玲 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京泛生子醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京泛生子基因科技有限公司;北京泛生子醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司;重慶今創(chuàng)泛生醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
地址 102206 北京市昌平區(qū)回龍觀鎮(zhèn)中關(guān)村生命科學(xué)園生命園路8號(hào)院一區(qū)11號(hào)樓2層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于檢測(cè)目的基因低頻突變的擴(kuò)增子文庫的構(gòu)建方法。本發(fā)明提供了一種用于檢測(cè)目的基因低頻突變的擴(kuò)增子文庫的構(gòu)建方法，包括如下步驟：1)設(shè)計(jì)合成Barcode引物F1、上游引物F2、下游外引物R1、下游內(nèi)引物R2；2)用所述Barcode引物F1、所述上游引物F2、所述下游外引物R1和所述下游內(nèi)引物R2對(duì)待測(cè)樣本cfDNA進(jìn)行一步PCR擴(kuò)增，得到擴(kuò)增產(chǎn)物，即為用于擴(kuò)增子測(cè)序的DNA文庫。該方法除能檢測(cè)組織樣本外，還能夠快速、簡(jiǎn)便、靈敏、特異的對(duì)血液、尿液以及腦脊液等樣本中游離DNA的不同區(qū)域進(jìn)行靶向擴(kuò)增，并高效檢測(cè)低至0.1％水平的突變，大大的簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作，有效避免文庫損失及污染，顯著降低成本，提高效率。