一種敲除AAV受體的方法、敲除了AAV受體的HEK293細胞株及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710553164.0 申請日 -
公開（公告）號 CN107245475B 公開（公告）日 2019-07-16
申請公布號 CN107245475B 申請公布日 2019-07-16
分類號 C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90;C12N7/00;C12R1/93 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李華鵬 申請（專利權）人 廣州派真生物技術有限公司
代理機構 廣州容大專利代理事務所（普通合伙） 代理人 廣州派真生物技術有限公司
地址 511370 廣東省廣州市高新技術開發(fā)區(qū)攬月路3號科學城國際企業(yè)孵化器G棟304
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及基因工程和細胞學領域，具體涉及一種AAV受體敲除方法、敲除AAV受體的HEK293細胞株及其應用；所述被敲除的AAV受體為KIAA0319L；所述敲除方法包括：構建靶向AAVR基因組序列的sgRNA載體；轉(zhuǎn)染293T細胞，培養(yǎng)得到各克隆細胞；Surveyor基因突變分析試驗；選出AAVR突變的單克??；再選擇出高產(chǎn)AAV的AAVR突變細胞株；鑒定其它潛在突變位點的突變情況；把無其它突變位點的細胞株再擴大，建庫以備生產(chǎn)。本發(fā)明的被敲除的AAV受體的HEK293細胞株生產(chǎn)AAV的最終產(chǎn)量比常規(guī)HEK293產(chǎn)量高出約50％。