一種基于基因編輯的獲得翅膀缺失的黑水虻的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910534977.4 申請日 -
公開（公告）號 CN112111527A 公開（公告）日 2020-12-22
申請公布號 CN112111527A 申請公布日 2020-12-22
分類號 C12N15/90;C12N9/22;A01K67/033;C12N15/11;C12N15/113 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃勇平;詹帥;王四寶;寇宗慶;許軍 申請（專利權(quán)）人 江蘇綠博低碳科技股份有限公司
代理機構(gòu) 上海恒慧知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 陳傳喜
地址 200032 上海市徐匯區(qū)楓林路300號4號樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于基因編輯的獲得翅膀缺失的黑水虻的方法。其包括以下步驟：（1）將vestigial基因敲除的模板引物sgRNA1?F和sgRNA2?F分別和通用的反向引物進行PCR，將PCR產(chǎn)物回收純化，即得模板sgRNA；（2）將所述的模板sgRNA進行體外大量擴增，獲得單鏈狀態(tài)的sgRNA；（3）將所述的單鏈狀態(tài)的sgRNA和cas9蛋白混合，顯微注射入黑水虻新產(chǎn)受精卵中；（4）將所述注射后的卵催青直到孵化，飼養(yǎng)，挑選翅膀缺失的個體。本發(fā)明成功利用基因編輯技術(shù)實現(xiàn)了翅膀發(fā)育基因的成功敲除，黑水虻翅膀的缺失。這種非轉(zhuǎn)基因的育種養(yǎng)殖方式對于大規(guī)模飼養(yǎng)黑水虻中防止逃逸具有重要意義，為大規(guī)模安全飼養(yǎng)黑水虻提供堅實保障。