單細(xì)胞測序的建庫方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910868822.4 申請日 -
公開（公告）號 CN110438572A 公開（公告）日 2019-11-12
申請公布號 CN110438572A 申請公布日 2019-11-12
分類號 C40B50/06（2006.01）I; C12Q1/6869（2018.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 孔培濤; 李奇; 陳亞慶; 楊圳; 蔡建飛 申請（專利權(quán)）人 上海其明信息技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京金信知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 上海其明信息技術(shù)有限公司
地址 201210 上海市浦東新區(qū)張江高科技園區(qū)張江路665號907室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種單細(xì)胞測序的建庫方法，其包括(a)對甲醛固定的細(xì)胞利用第一反轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)反轉(zhuǎn)錄標(biāo)記第一輪條形碼(barcode)；(b)利用連接反應(yīng)，使用第二輪引物和第三輪引物標(biāo)記第二輪和第三輪barcode；(c)裂解生成子文庫，模板轉(zhuǎn)換后，利用PCR富集模板；(d)利用index PCR標(biāo)記第四輪barcode。本發(fā)明的建庫方法采用固定的細(xì)胞或者細(xì)胞核作為實(shí)驗(yàn)材料，而不僅限于新鮮的樣品，允許樣品來源的復(fù)雜性，可以更為有效地利用樣品。