一種普魯蘭酶產(chǎn)酶菌株及提高其產(chǎn)酶能力的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510062696.5 申請日 -
公開（公告）號 CN104726388A 公開（公告）日 2015-06-24
申請公布號 CN104726388A 申請公布日 2015-06-24
分類號 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C12N9/44(2006.01)I;C12R1/22(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 焦國寶;邱立友;孫利鵬;王明道;許苗苗;劉仲敏 申請（專利權(quán)）人 河南新仰韶生物酶制劑有限公司
代理機(jī)構(gòu) 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 時立新
地址 472400 河南省三門峽市澠池縣黃花工業(yè)區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌構(gòu)建方法及所構(gòu)建高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌株。該方法包括提取DNA、PCR擴(kuò)增、PCR融合、電擊轉(zhuǎn)化、篩選鑒定等步驟。所構(gòu)建高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌株保藏編號為CGMCC?NO.10357的變棲克雷伯氏菌HN7（Klebsiella?variicola??HN7）為原始出發(fā)菌株。本發(fā)明通過基因工程技術(shù)將枯草芽孢桿菌P43啟動子轉(zhuǎn)化進(jìn)入產(chǎn)普魯蘭酶原始菌株，操作方式易于實現(xiàn)。由于普魯蘭酶得以在本體內(nèi)得到表達(dá)，合成和分泌途徑?jīng)]有發(fā)生改變，不會發(fā)生質(zhì)粒丟失現(xiàn)象，因而遺傳穩(wěn)定性高；本發(fā)明所構(gòu)建高產(chǎn)普魯蘭酶工程菌株相較原始出發(fā)菌株，普魯蘭酶的酶活和酶表達(dá)量具有較好的提高，因而具有較好的推廣應(yīng)用價值。