重組人載脂蛋白Pro-ApoAIm的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN03150703.4 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN100516216C 公開（公告）日 2009-07-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN100516216C 申請(qǐng)公布日 2009-07-22
分類號(hào) C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12P21/00(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 龔邦強(qiáng);丁滿生;張梅芳 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海凱曼生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海智信專利代理有限公司 代理人 凱惠醫(yī)藥科技（上海）有限公司;成都睿智化學(xué)研究有限公司
地址 201203上海市浦東新區(qū)張江高科技園區(qū)蔡倫路720弄3號(hào)樓302室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種構(gòu)建人載脂蛋白AImilano表達(dá)基因的制備方法。該方法采用PCR引物制成pro-ApoAIm的基因，構(gòu)建表達(dá)基因PET12a/PAPOAIm重組質(zhì)粒再進(jìn)行工程菌的構(gòu)建，然后構(gòu)建的工程菌在一定的發(fā)酵條件下發(fā)酵，進(jìn)行pApoAIm的蛋白純化，純化的蛋白再制成pro-ApoAIm蛋白二聚體形式。本方法具有pro-ApoAIm比ApoAIm性質(zhì)更穩(wěn)定，在大腸桿菌表達(dá)體系中采用T7啟動(dòng)子表達(dá)載體pET12a，用IPTG誘導(dǎo)目的蛋白的生產(chǎn)，產(chǎn)生蛋白是包涵體，它能有效防止蛋白水解酶對(duì)異源蛋白的水解等特點(diǎn)。