抗菌肽-溶菌酶融合蛋白的制備方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510486586.1 申請日 -
公開(公告)號 CN105061603B 公開(公告)日 2019-05-17
申請公布號 CN105061603B 申請公布日 2019-05-17
分類號 C07K19/00(2006.01)I; C12N9/36(2006.01)I; C12N15/62(2006.01)I; C12N15/70(2006.01)I; A61K38/47(2006.01)I; A61P31/04(2006.01)I; A61P1/12(2006.01)I; A61P11/00(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 舒建洪; 王偉東; 呂正兵; 姜衛(wèi)亮; 徐華強(qiáng) 申請(專利權(quán))人 浙江益肽生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 寧波市鄞州甬致專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 浙江益肽生物科技有限公司;杭州千島湖生物谷高科技有限公司
地址 324022 浙江省衢州市東港一路10號3幢301、302室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種抗菌肽?溶菌酶融合蛋白,該蛋白從N端?C端依次包含抗菌肽thanatin蛋白、3GSA柔性肽、T4溶菌酶蛋白。制備方法如下:采用人工合成獲得包含抗菌肽thanatin、3GSA柔性肽、T4溶菌酶編碼基因序列;以pETDuet質(zhì)粒為載體,構(gòu)建重組質(zhì)粒;轉(zhuǎn)化至BL21中,篩選獲得表達(dá)菌株;挑取單克隆至LB培養(yǎng)基,進(jìn)行蛋白誘導(dǎo),得到在上清表達(dá)的融合蛋白;融合蛋白純化,切除Sumo標(biāo)簽,得到目的抗菌肽?溶菌酶融合蛋白。該蛋白被證明在提高仔豬成活率、降低保育豬的腹瀉率、降低保育豬的呼吸道病發(fā)病率方面具有顯著效果,可用于制備相關(guān)藥物制劑。