一種晶狀體上皮干細胞的分離培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510032551.0 申請日 -
公開(公告)號 CN104789521B 公開(公告)日 2017-11-07
申請公布號 CN104789521B 申請公布日 2017-11-07
分類號 C12N5/074(2010.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 侯睿;蔡惠民;李歐俏 申請(專利權(quán))人 廣州康睿生物醫(yī)藥科技股份有限公司
代理機構(gòu) 成都高遠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 廣州康睿生物醫(yī)藥科技股份有限公司
地址 510663 廣東省廣州市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)科學(xué)城攬月路3號廣州國際企業(yè)孵化器F區(qū)F616號房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種晶狀體上皮干細胞的分離培養(yǎng)方法,它包括以下步驟:(1)取晶狀體前囊膜,剪成碎片,消化,將獲得的細胞鋪于包被有基質(zhì)的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中;(2)加入添加有含有15~25%FBS、50~150μg/L人表皮生長因子(FGF)、5?10mg/L胰島素、5?10mg/L氫化可的松、5?10mg/L霍亂弧菌毒素、0.01?0.05mg/L3,3′,5?碘?L?對羥基苯丙氨酸、1?5mg/L腺嘌呤、5~10mg/L甘氨酸、6~12mg/L丙氨酸、10~16mg/L天冬酰胺、10~16mg/L天冬氨酸、12~18mg/L谷氨酸、8~15mg/L脯氨酸、7~14mg/L絲氨酸的MEM培養(yǎng)液,放入37℃孵箱中培養(yǎng),2?3天形成克隆,10?14天可形成單層活性的晶體干細胞細胞。本發(fā)明還公開了一種晶狀體上皮干細胞的分離培養(yǎng)液。本發(fā)明方法可以分離得到原代晶狀體上皮干細胞,干細胞的活性高,本發(fā)明方法簡便、易操作,應(yīng)用前景良好。