哺乳動(dòng)物雙基因高效篩選表達(dá)載體及其構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510313438.X 申請日 -
公開（公告）號 CN104946687B 公開（公告）日 2018-09-14
申請公布號 CN104946687B 申請公布日 2018-09-14
分類號 C12N15/85 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周海平;李紅英;昝琰璐;王浛;盧薇;白義;白先宏 申請（專利權(quán)）人 北京精益泰翔技術(shù)發(fā)展有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100176 北京市大興區(qū)北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)榮京東街2號1幢406室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了哺乳動(dòng)物雙基因高效篩選表達(dá)載體及其構(gòu)建方法；本發(fā)明涉及哺乳動(dòng)物雙基因高效篩選表達(dá)載體pGD、pGN，載體pGD攜帶GS和DHFR篩選基因，載體pGN攜帶GS和NEO篩選基因，同時(shí)在篩選基因前的SV40啟動(dòng)子中引入了缺失突變，實(shí)現(xiàn)篩選基因的轉(zhuǎn)錄弱化，而且所述載體與帶有強(qiáng)啟動(dòng)子pEF?1α的目的基因表達(dá)元件相連接，可快速篩選出高效表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，為哺乳動(dòng)物細(xì)胞中制備重組蛋白提供了新的工具。所述載體篩選高表達(dá)單克隆細(xì)胞,具有速度快、陽性克隆率高、目的蛋白表達(dá)量高等特點(diǎn)。