一種液相捕獲文庫(kù)構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111179418.X 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113774496A 公開(kāi)（公告）日 2021-12-10
申請(qǐng)公布號(hào) CN113774496A 申請(qǐng)公布日 2021-12-10
分類號(hào) C40B50/10（2006.01）I;C40B40/08（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 王永利;賀田芬;鞠巍;湯鏈;徐根明;胡桑 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 湖南大地同年生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 長(zhǎng)沙市融智專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 袁靖
地址 410205湖南省長(zhǎng)沙市岳麓區(qū)高新區(qū)麓谷企業(yè)廣場(chǎng)E4棟1單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種液相捕獲文庫(kù)構(gòu)建方法。（1）獲取進(jìn)行了5’端接頭連接的雙鏈DNA片段，雙鏈DNA片段的長(zhǎng)度為100?300bp；（2）加入探針到步驟（1）的體系中捕獲目標(biāo)區(qū)域；（3）捕獲到的目標(biāo)區(qū)域DNA單鏈或者cDNA，進(jìn)行3’端輔助連接，延伸成DNA雙鏈；（4）對(duì)于步驟（3）獲得的延伸產(chǎn)物采用通用引物直接進(jìn)行擴(kuò)增，得到目標(biāo)區(qū)域文庫(kù)。同傳統(tǒng)技術(shù)方法相比，省掉了構(gòu)建預(yù)文庫(kù)的步驟，并且創(chuàng)造性地省掉了傳統(tǒng)技術(shù)中必須要使用的接頭序列封閉寡核苷酸，整個(gè)文庫(kù)構(gòu)建時(shí)間縮短到了6小時(shí)以內(nèi)。這樣，不僅使操作流程更簡(jiǎn)潔不易出錯(cuò)，而且極大降低了檢測(cè)成本，具有很好的應(yīng)用前景。