基于距離信號(hào)輸出的靶核酸即時(shí)檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111359300.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN114182035A 公開（公告）日 2022-03-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN114182035A 申請(qǐng)公布日 2022-03-15
分類號(hào) C12Q1/6895（2018.01）I;C12Q1/6834（2018.01）I;C12N15/113（2010.01）I;C12R1/72（2006.01）N;C12R1/66（2006.01）N;C12R1/645（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 徐志南;黃迪 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 杭州孚斯泰生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司 代理人 劉曉春
地址 310000浙江省杭州市西湖區(qū)三墩鎮(zhèn)振華路298號(hào)西港發(fā)展中心西4幢9樓908-24室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種基于距離信號(hào)輸出的靶核酸即時(shí)檢測(cè)方法，具體包含一種CRISPR Cas12響應(yīng)的DNA智能水凝膠和基于距離信號(hào)輸出的紙基微流控芯片。反應(yīng)流程包括：（1）對(duì)待測(cè)樣品中的總核酸進(jìn)行提??；（2）借助等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)對(duì)核酸檢測(cè)片段進(jìn)行擴(kuò)增；（3）通過CRISPR Cas12a體系對(duì)擴(kuò)增片段進(jìn)行識(shí)別，利用其核酸酶活性對(duì)DNA智能水凝膠進(jìn)行切割，并釋放其中包埋的信號(hào)分子；（4）借助紙基微流控芯片上的級(jí)聯(lián)酶反應(yīng)對(duì)信號(hào)進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終借助芯片上色柱的距離信號(hào)進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果的讀取。該方法操作便攜，無需大型儀器輔助，成本低廉，且保持了傳統(tǒng)CRISPR Cas12體系選擇性好、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，具有應(yīng)用前景。