一種昆蟲細(xì)胞的光控表達(dá)載體及應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201711177112.4 申請日 -
公開(公告)號 CN107937437A 公開(公告)日 2018-04-20
申請公布號 CN107937437A 申請公布日 2018-04-20
分類號 C12N15/85;C12N15/65 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 吳陽;徐富強;何曉斌;蔡澤蘄;蔣良玉;梅婷;尚敏 申請(專利權(quán))人 布林凱斯(深圳)生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 武漢宇晨專利事務(wù)所 代理人 中國科學(xué)院武漢物理與數(shù)學(xué)研究所
地址 430071 湖北省武漢市武昌區(qū)小洪山西30號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種昆蟲細(xì)胞的光控表達(dá)載體及應(yīng)用,申請人基于VP?EL222光控轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng),在昆蟲細(xì)胞表達(dá)載體pMIB/V5?HisA上成功構(gòu)建陽性質(zhì)粒pMIB?C120?mCherry?GFP?EL222和對照質(zhì)粒pMIB?C120?mCherry?GFP;轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞后,綠色熒光蛋白表達(dá)而紅色熒光蛋白不表達(dá)。經(jīng)藍(lán)光照射刺激后,紅色熒光蛋白表達(dá);對照質(zhì)粒pMIB?C120?mCherry?GFP轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞后,綠色熒光蛋白表達(dá)而紅色熒光蛋白不表達(dá)。經(jīng)藍(lán)光照射刺激,由于沒有EL222轉(zhuǎn)錄因子,紅色熒光蛋白仍然不表達(dá)。所述光控誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)首次成功運用到昆蟲細(xì)胞上,拓展了該技術(shù)的應(yīng)用范圍。本發(fā)明所構(gòu)建的驗證方法質(zhì)粒也為利用光控誘導(dǎo)表達(dá)技術(shù)提供了靈活和易用的方法。