一種針對(duì)細(xì)胞分選后的單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010423323.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN111575346A 公開(kāi)(公告)日 2020-08-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN111575346A 申請(qǐng)公布日 2020-08-25
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6806(2018.01)I 分類(lèi) -
發(fā)明人 陸思嘉;任軍;萬(wàn)成;胡春旭;姚雅馨 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 泰州億康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 江蘇昆成律師事務(wù)所 代理人 泰州億康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司
地址 225300江蘇省泰州市陸家路西側(cè)、濱河路北側(cè)疫苗工程中心B1東側(cè)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本申請(qǐng)涉及一種針對(duì)細(xì)胞分選后的單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增方法,包括步驟:(a)對(duì)含有目標(biāo)微量細(xì)胞的樣本進(jìn)行細(xì)胞分選,獲得目標(biāo)微量細(xì)胞;(b)將目標(biāo)微量細(xì)胞采用溫和裂解體系進(jìn)行裂解,獲得DNA,所述溫和裂解體系包含溫和裂解配方、較低的裂解溫度和較長(zhǎng)的裂解時(shí)間;(c)對(duì)步驟(b)獲取的DNA采用優(yōu)化的ChromInst擴(kuò)增體系進(jìn)行擴(kuò)增獲得擴(kuò)增產(chǎn)物,所述優(yōu)化的ChromInst體系包含優(yōu)化的擴(kuò)增緩沖液和引物濃度、以及無(wú)dU容忍性的DNA聚合酶;能夠降低細(xì)胞分選后的細(xì)胞損傷、核酸片段化、DNA?蛋白質(zhì)交聯(lián)以及堿基變異,從而提高擴(kuò)增效率、擴(kuò)增均勻性以及降低擴(kuò)增錯(cuò)誤率。??