長效重組人促紅素的生產(chǎn)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201711452469.9 申請日 -
公開（公告）號 CN107937425A 公開（公告）日 2018-04-20
申請公布號 CN107937425A 申請公布日 2018-04-20
分類號 C12N15/62;C07K19/00;C07K1/22;C07K1/16 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 程度勝;桑建彬;薛霞;韓明娣;龍應(yīng)國 申請（專利權(quán)）人 北京四環(huán)生物制藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京同輝知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 北京四環(huán)生物制藥有限公司
地址 100176 北京市大興區(qū)建安街5號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種長效重組人促紅素的生產(chǎn)方法，包括如下步驟；將人IgG2的Fc片段基因連接到人促紅素基因的3′端，利用脂質(zhì)體將含有hEPO?Fc重組基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞；CHO細(xì)胞用無血清基質(zhì)經(jīng)擴(kuò)增培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分泌表達(dá)rhEPO?Fc融合蛋白；培養(yǎng)液經(jīng)過離心，取上清液，調(diào)pH值至3.5?4.0，濾膜過濾除去沉淀物；過濾后含目的蛋白的溶液上rProtein A Beads層析柱進(jìn)行層析分離，得粗rhEPO?Fc融合蛋白；粗rhEPO?Fc融合蛋白洗脫液用分子篩Superdex 200prep grade進(jìn)行純化，得精rhEPO?Fc融合蛋白。這種方法成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。