一種基于人工修飾引物的定量突變檢測(cè)系統(tǒng)

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410044150.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN103789436B 公開（公告）日 2015-09-30
申請(qǐng)公布號(hào) CN103789436B 申請(qǐng)公布日 2015-09-30
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 不公告發(fā)明人 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣西識(shí)遠(yuǎn)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100070 北京市豐臺(tái)區(qū)豐臺(tái)科學(xué)城航豐路8號(hào)1幢樓1808室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。更具體而言，本發(fā)明涉及基因突變的檢測(cè)。本發(fā)明提供了一種基于人工修飾引物的定量突變檢測(cè)系統(tǒng)。本發(fā)明的定量突變檢測(cè)系統(tǒng)主要包括引物設(shè)計(jì)、PCR反應(yīng)和產(chǎn)物檢測(cè)三個(gè)步驟。通過在引物3’端5個(gè)堿基的區(qū)域內(nèi)引入一個(gè)或者一個(gè)以上的人工突變，并基于調(diào)節(jié)3’端引物與模板結(jié)合的熱力學(xué)性質(zhì)來確保DNA聚合酶結(jié)合時(shí)具有一定的穩(wěn)定性，但又不至于太高，從而降低了假陽性，顯著提高了選擇性；通過在引物5’端加熒光以及聯(lián)用熒光毛細(xì)管電泳來檢測(cè)PCR產(chǎn)物，進(jìn)一步提高了選擇性，并可實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品突變的半定量分析。