布氏錐蟲(chóng)苯丙氨酰tRNA合成酶的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200910056686.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN101633915A 公開(kāi)（公告）日 2010-01-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN101633915A 申請(qǐng)公布日 2010-01-27
分類(lèi)號(hào) C12N9/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姚瓔;杲光偉;李大偉 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 泰州新生源生物醫(yī)藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海交達(dá)專(zhuān)利事務(wù)所 代理人 上海交通大學(xué);泰州新生源生物醫(yī)藥有限公司
地址 200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種生物技術(shù)領(lǐng)域的酶的布氏錐蟲(chóng)苯丙氨酰tRNA合成酶的制備方法，具體步驟如下：分別設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增布氏錐蟲(chóng)苯丙氨酸t(yī)RNA合成酶的α亞基和β亞基基因；將α亞基和β亞基基因分別克隆到原核表達(dá)載體pET21a(+)中，構(gòu)建pET21a(+)-PheRSα及pET21a(+)-PheRSβ表達(dá)載體；將α亞基的操縱子亞克隆到pET21a(+)-PheRSβ中，形成重組共表達(dá)載體pET21a(+)-PheRSαβ；將重組共表達(dá)載體pET21a(+)-PheRSαβ轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)RIPL中，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)；收集裂解后的菌液上清，純化蛋白，得布氏錐蟲(chóng)苯丙氨酰tRNA合成酶。本發(fā)明構(gòu)建布氏錐蟲(chóng)苯丙氨酸t(yī)RNA合成酶(PheRS)的重組質(zhì)粒，表達(dá)純化出布氏錐蟲(chóng)苯丙氨酸t(yī)RNA合成酶蛋白，為抗寄生蟲(chóng)藥物的篩選奠定了基礎(chǔ)。