一種表達木糖還原酶基因的質粒的構建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200810064829.2 申請日 -
公開（公告）號 CN101302533B 公開（公告）日 2010-09-08
申請公布號 CN101302533B 申請公布日 2010-09-08
分類號 C12N15/66(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 平文祥;葛菁萍;凌宏志;杜春梅;宋剛;趙丹;高冬妮;于新 申請（專利權）人 南通國邦科技發(fā)展有限公司
代理機構 哈爾濱市松花江專利商標事務所 代理人 單軍
地址 150080 黑龍江省哈爾濱市南崗區(qū)學府路74號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種表達木糖還原酶基因的質粒的構建方法，它涉及一種質粒載體的構建方法。它解決了釀酒酵母中缺少木糖還原酶，不具備木糖代謝能力，不能有效發(fā)酵植物纖維水解液的問題。構建方法：先克隆XYL1基因、ADHt基因序列和KanR基因；再回收、純化步驟一至三制備的基因片段，分別與載體連接；然后構建質粒pADH、質粒pAK；再將XYL1基因引入質粒pAK，即得到表達木糖還原酶基因的質粒。本發(fā)明方法將木糖還原酶基因XYL1和乙醇脫氫酶的強啟動子的終止子序列構建于同一個質粒載體上，在增添了木糖代謝為乙醇的途徑外，還抑制了木糖代謝為木糖醇，能夠介導釀酒酵母高效代謝木糖生產乙醇。