一種惡臭假單胞菌細(xì)胞色素P450環(huán)氧酶突變體及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111599580.7 申請日 -
公開（公告）號 CN114214293A 公開（公告）日 2022-03-22
申請公布號 CN114214293A 申請公布日 2022-03-22
分類號 C12N9/02（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12P17/02（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉立明;燕宇;宋偉;陳修來;劉佳;高聰 申請（專利權(quán)）人 無錫阿科力科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 趙巧娜
地址 214122江蘇省無錫市錫山區(qū)民祥路29號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種惡臭假單胞菌細(xì)胞色素P450環(huán)氧酶突變體及其應(yīng)用，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過對來源于惡臭假單胞菌的細(xì)胞色素P450環(huán)氧酶進(jìn)行改造，克服了之前野生型的酶因?yàn)檫^氧化氫逸散和酸醇對質(zhì)子轉(zhuǎn)化率低而導(dǎo)致的催化效率低的局限，最終得到最佳突變體Q6（PpCytPA250V/T255E/S296V/A297P/P298N），以此突變體為催化劑，以降冰片烯為底物，轉(zhuǎn)化后10mL規(guī)模搖瓶產(chǎn)量為72.05g/L，摩爾產(chǎn)率為61.59％，單位菌體生產(chǎn)環(huán)氧降冰片烷的能力為3.6g/g，幾乎不產(chǎn)生羥基化副產(chǎn)物。因此大大降低了之前的高菌體量以及繁復(fù)的后期分離純化過程，為環(huán)氧降冰片烷的工業(yè)化生產(chǎn)和綠色生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。