一種原核表達細胞及其制備方法和應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010659296.3 申請日 -
公開(公告)號 CN111705032A 公開(公告)日 2020-09-25
申請公布號 CN111705032A 申請公布日 2020-09-25
分類號 C12N1/21(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 高樂;王壹;張昊;栗慧超;于源華;宋禹 申請(專利權(quán))人 科赫生物科技(北京)有限公司
代理機構(gòu) 北京悅和知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 司麗春
地址 100000北京市大興區(qū)生物醫(yī)藥基地春林大街16號四層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實施例涉及一種原核表達細胞及其制備方法和應用,該原核表達細胞能共表達肝素酶I HepA’和分子伴侶素CpkA。肝素酶I HepA’的氨基酸序列中,關鍵是用帶凈正電荷的信號標簽肽取代HepA中前導肽氨基酸序列。改造后的含有一段帶凈正電荷的信號標簽肽的肝素酶I HepA’在原核表達細胞中的表達量大大提高,尤其是存在于上清液中的蛋白量大大提高;同時由于CpkA的羧基端帶凈負電荷,其與帶凈正電荷的信號標簽肽產(chǎn)生靜電相互作用,使得CpkA和HepA’結(jié)合力更強,因此CpkA可以更有效地幫助HepA’折疊成正確的構(gòu)象,從而提高其可溶性表達。??