一種構(gòu)建鏈特異RNA文庫(kù)的方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811055627.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109234813B 公開（公告）日 2021-11-16
申請(qǐng)公布號(hào) CN109234813B 申請(qǐng)公布日 2021-11-16
分類號(hào) C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 盧文翔;王瑩;涂慧珍;白云飛;顧萬君;朱毅華;鄭衛(wèi)國(guó) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 南京迪康金諾生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 藍(lán)霞
地址 211102江蘇省南京市江寧區(qū)誠(chéng)信大道1788號(hào)中致科技平臺(tái)3層301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種新的構(gòu)建鏈特異RNA文庫(kù)的方法，尤其涉及一種構(gòu)建鏈特異RNA文庫(kù)的方法及應(yīng)用。該方法將RNA片段化處理得到片段化的RNA，將片段化的RNA逆轉(zhuǎn)錄后采用RNase H消化RNA/DNA雜合體，消化產(chǎn)物與接頭連接得到連接產(chǎn)物，連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物即為鏈特異RNA文庫(kù)。本發(fā)明采用RNase H消化RNA/DNA雜合體后，直接進(jìn)行雙端接頭連接，得到鏈特異性RNA文庫(kù)；同時(shí)優(yōu)化的反應(yīng)體系使得從樣品RNA到接頭連接完成只需在一管中順次加入反應(yīng)試劑即可進(jìn)行。與常規(guī)鏈特異性RNA文庫(kù)構(gòu)建方法相比，克服了技術(shù)的復(fù)雜性與繁瑣性，節(jié)省了大量人力、時(shí)間與試劑成本。