一種培養(yǎng)表達(dá)重組人表皮生長(zhǎng)因子的工程菌的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910897501.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN110564661A 公開(kāi)（公告）日 2019-12-13
申請(qǐng)公布號(hào) CN110564661A 申請(qǐng)公布日 2019-12-13
分類號(hào) C12N1/21（2006.01）; C12P21/02（2006.01）; C12R1/19（2006.01） 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 錢(qián)永常; 張旭初; 宋葉華 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 杭州紐龍生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京德琦知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 杭州紐龍生物科技有限公司
地址 310018 浙江省杭州市蕭山區(qū)寧圍街道泰宏巷40號(hào)聯(lián)合中心北區(qū)2幢601室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種培養(yǎng)表達(dá)重組人表皮生長(zhǎng)因子的工程菌的方法，所述方法包括下述步驟：(1)一級(jí)種子培養(yǎng)，將甘油凍存的工程菌接種至包含卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，得到一級(jí)種子培養(yǎng)液；(2)二級(jí)種子培養(yǎng)，將步驟(1)中得到的所述一級(jí)種子培養(yǎng)液接種至包含卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，得到二級(jí)種子培養(yǎng)液；(3)將步驟(2)中得到的所述二級(jí)種子培養(yǎng)液接種至發(fā)酵罐中，培養(yǎng)，然后誘導(dǎo)，得到發(fā)酵罐上清液；和(4)從步驟(3)中得到的所述發(fā)酵罐上清液中分離和純化重組人表皮生長(zhǎng)因子。其中，所述一級(jí)種子培養(yǎng)液的OD600為2至3，并且所述二級(jí)種子培養(yǎng)液的OD600為3.5至4。通過(guò)本發(fā)明的方法，縮短了工程菌的發(fā)酵時(shí)間，提高了hEGF的產(chǎn)量。