一種制備載藥外泌體的方法及載藥外泌體

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010094234.2 申請日 -
公開(公告)號 CN111378685A 公開(公告)日 2020-07-07
申請公布號 CN111378685A 申請公布日 2020-07-07
分類號 C12N15/85(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 王程;董鳴;何慧瓊 申請(專利權(quán))人 深圳承啟生物科技有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 518000廣東省深圳市龍華區(qū)民治街道樟坑社區(qū)青創(chuàng)城C棟3A3
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種制備載藥外泌體的方法及載藥外泌體。所述方法包括以下步驟:步驟(1):利用無外泌體的培養(yǎng)基培養(yǎng)改造HEK293T細(xì)胞并收集細(xì)胞;步驟(2):將HEK293T細(xì)胞置于具有多個直徑為200?600 nm通道的基材內(nèi)培養(yǎng),然后將基材放入目標(biāo)質(zhì)粒DNA的緩沖液中,先進(jìn)行電穿孔,然后定向電流刺激8?12小時;步驟(3):對所得緩沖液進(jìn)行超速離心,收集沉淀并用緩沖溶液進(jìn)行重懸得到負(fù)載基因藥物的外泌體。利用所述方法,能夠獲得大量的載藥外泌體,同時大大提高了外泌體的核酸藥物包載量。同時,該方法將外泌體純化和載藥步驟合二為一,使細(xì)胞分泌的負(fù)載目標(biāo)基因藥物的外泌體,同時極大改善其產(chǎn)量、靶向性和適用性。??