犬原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清分離提取方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010439534.X 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN111440766A 公開(kāi)(公告)日 2020-07-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN111440766A 申請(qǐng)公布日 2020-07-24
分類(lèi)號(hào) C12N5/0775(2010.01)I 分類(lèi) -
發(fā)明人 張樹(shù)義;趙文亮;王喆;孫玉忠;張宏 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 遼寧派美特生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京八月瓜知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);遼寧派美特生物技術(shù)有限公司
地址 110011遼寧省沈陽(yáng)市沈河區(qū)東陵路120號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了犬原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清分離提取方法,包括以下步驟:S1:實(shí)驗(yàn)前培養(yǎng)箱、實(shí)驗(yàn)用具滅菌,試劑提前配置好,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加脂肪MSC添加因子和1%PS,即雙抗,制備成完全培養(yǎng)基,室溫放置;S2:通過(guò)外科手術(shù)在犬腹部或腹股溝處取皮下脂肪10ml;S3:20mlPBS,即磷酸緩沖鹽溶液,加1%PS置于冰盒中帶回實(shí)驗(yàn)室放入超凈臺(tái)中;S4:PBS沖洗3次直到液體無(wú)血色后剔除筋膜和血管將脂肪放在培養(yǎng)皿中剪成糊狀;S5:將剪好的脂肪放入50ml離心管內(nèi),PBS反復(fù)清洗,在1000r/min離心5min去上清;本發(fā)明的目的在于提供犬原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清分離提取方法,提供了一種安全、簡(jiǎn)單方便、高質(zhì)量、高純度的犬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的提取培養(yǎng)體系。??