一種人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代分離培養(yǎng)及鑒定方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710946120.4 申請日 -
公開（公告）號 CN109652361A 公開（公告）日 2019-04-19
申請公布號 CN109652361A 申請公布日 2019-04-19
分類號 C12N5/071（2010.01）I; C12Q1/02（2006.01）I; G01N33/68（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 曹延粉; 趙燕芳; 黃慶雷 申請（專利權(quán)）人 北京弘潤天源基因生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100085 北京市海淀區(qū)開拓路5號2層B222室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明主要是涉及生物技術(shù)領(lǐng)域細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定方法，尤其涉及一種分離培養(yǎng)臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)的方法，內(nèi)容如下：采用健康產(chǎn)婦新生兒臍帶，在生物安全柜內(nèi)，將預(yù)熱的I型膠原酶灌注入臍靜脈血管，并浸沒在預(yù)熱的生理鹽水中消化，消化完成后將靜脈血管漂洗，合并離心后棄上清，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀即可開始培養(yǎng)，本發(fā)明操作簡單，整個(gè)消化過程處于操作臺內(nèi)，消化溫度略低于37℃，適當(dāng)?shù)脑黾恿讼瘯r(shí)間，對于較細(xì)小的血管組織不會(huì)造成過度消化，同時(shí)避免了環(huán)境和其它雜細(xì)胞的污染風(fēng)險(xiǎn)，所得到的內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)、表面的免疫表型及成管特性均為典型的內(nèi)皮細(xì)胞特征，而且剩余的臍帶組織仍可用于臍帶組織其它細(xì)胞的分離處理如臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)。