一種提高多重PCR擴(kuò)增文庫(kù)質(zhì)量的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010358106.4 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN111518879A 公開(公告)日 2020-08-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN111518879A 申請(qǐng)公布日 2020-08-11
分類號(hào) C12Q1/686(2018.01)I;C40B50/06(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃文潘;浦浩;張亞楠 申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海茂槿生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳舍穆專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 代理人 黃賢炬
地址 201815上海市嘉定區(qū)興賢路1180號(hào)5幢2層208
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種提高多重PCR擴(kuò)增文庫(kù)質(zhì)量的方法,屬于PCR擴(kuò)增技術(shù)領(lǐng)域。該方法是根據(jù)多重PCR中每個(gè)擴(kuò)增子的擴(kuò)增靶標(biāo)序列來(lái)設(shè)計(jì)、合成兩端含有與擴(kuò)增子對(duì)應(yīng)引物結(jié)合位點(diǎn)的多重PCR擴(kuò)增差異靶標(biāo),該差異靶標(biāo)和理論的擴(kuò)增靶標(biāo)序列具有編輯距離大于5bp的差異,構(gòu)建人工合成差異核苷酸序列集合IAC。將IAC加入PCR反應(yīng)體系中進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增反應(yīng),引物可以結(jié)合到IAC集合上,大大減少多重PCR擴(kuò)增中非靶標(biāo)引物形成引物二聚體和產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增的可能,從而提高多重PCR擴(kuò)增文庫(kù)的質(zhì)量,為后續(xù)檢測(cè)出待檢靶標(biāo)提供較好的基礎(chǔ)。??