基于半連接PCR技術的二代測序文庫構建方法及試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910119367.8 申請日 -
公開（公告）號 CN111575357A 公開（公告）日 2020-08-25
申請公布號 CN111575357A 申請公布日 2020-08-25
分類號 C12Q1/6869;C12Q1/686;C40B50/06 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王力剛 申請（專利權）人 北京全譜醫(yī)學檢驗實驗室有限公司
代理機構 - 代理人 -
地址 100000 北京市大興區(qū)亦莊經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號E2座101室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于分子生物學領域，涉及一種基于半連接PCR技術的二代測序文庫構建方法及其應用。本發(fā)明實現(xiàn)方式有兩種：（1）通過去除打斷雙鏈DNA 5’?磷酸基團，阻斷打斷后DNA雙鏈兩5’端與接頭連接；而接頭的另一條鏈含有5’?磷酸基團，能夠與打斷后DNA雙鏈兩3’端連接，從而實現(xiàn)半連接。（2）通過在連接接頭的3’端進行分子修飾，此分子修飾可以阻斷接頭平末端3’端與打斷后DNA的5’端連接。本發(fā)明在將雙鏈DNA打斷后，通過半連接的方式針對含有UBC序列的DNA區(qū)域進行擴增，同時引入測序接頭，集合了三種方法的優(yōu)勢，還有效避免了不含UBC序列的形成測序文庫，非特異擴增，片斷分布不集中等缺點。