一種免疫組庫(kù)測(cè)序文庫(kù)的構(gòu)建方法及試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910119361.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN111575343A 公開（公告）日 2020-08-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN111575343A 申請(qǐng)公布日 2020-08-25
分類號(hào) C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06;C12N15/11 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王力剛 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京全譜醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100000 北京市大興區(qū)亦莊經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號(hào)E2棟101室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種免疫組庫(kù)測(cè)序文庫(kù)的構(gòu)建方法及試劑盒本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種免疫組庫(kù)多樣性的檢測(cè)方法。本發(fā)明的目的之一提供一種免疫組庫(kù)測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建的方法，（a）提取樣本RNA，（b）使用逆轉(zhuǎn)錄引物逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，并在末端添加含有分子標(biāo)簽序列的特異性接頭，（c）以b步產(chǎn)物為模板，通過特異性接頭引物與含有分子標(biāo)簽序列的基因特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增，（d）最后在擴(kuò)增產(chǎn)物上添加測(cè)序文庫(kù)接頭，完成文庫(kù)構(gòu)建。在分析測(cè)序數(shù)據(jù)時(shí)，通過分子標(biāo)簽序列識(shí)別原始RNA分子，排除擴(kuò)增偏倚。使用該方法可以覆蓋TCR和BCR的全部CDR區(qū)域，并且有效排除PCR擴(kuò)增偏倚干擾，特異性更強(qiáng)，分析結(jié)果更準(zhǔn)確。本發(fā)明的目的之二是提供一個(gè)免疫組庫(kù)測(cè)序的試劑盒。