變形鏈球菌重組亞單位基因工程疫苗候選抗原Glu的純化方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410082929.3 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN103820414B 公開(kāi)（公告）日 2016-08-17
申請(qǐng)公布號(hào) CN103820414B 申請(qǐng)公布日 2016-08-17
分類(lèi)號(hào) C12N9/10(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張衛(wèi)軍;劉開(kāi)云;付強(qiáng);鄒全明;郭剛;張怡;孫紅武;付啟歡;樊紹文;盧陸;高鶯 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 重慶原倫生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 重慶志合專(zhuān)利事務(wù)所 代理人 胡榮琿
地址 611731 四川省成都市高新區(qū)天欣路99號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種變形鏈球菌重組亞單位基因工程獲選疫苗抗原Glu的純化方法，包含步驟：收集發(fā)酵的變形鏈球菌重組亞單位基因工程疫苗Glu蛋白的大腸桿菌菌體，采用高壓勻漿破菌，收集上清，離心上清，收集沉淀；包涵體洗滌；包涵體裂解：用含尿素的PBS緩沖液重懸，離心，棄沉淀，保存上清；初步復(fù)性：取含尿素的PB緩沖液，將包涵體溶解液逐滴緩慢加入到上述攪拌的緩沖液中，離心，棄沉淀，上清上柱純化；親和層析純化：在含尿素的PB緩沖液條件下對(duì)目的蛋白進(jìn)行純化，目的蛋白與填料結(jié)合后，用含氟化鈉的PB緩沖液進(jìn)行酶切洗脫，收集洗脫液即為層析純化的Glu蛋白。采用本發(fā)明的方法純化的抗原純度高，工藝簡(jiǎn)捷。