一種從土壤樣本中高效擴增微生物DNA的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010566375.X 申請日 -
公開（公告）號 CN111733219A 公開（公告）日 2020-10-02
申請公布號 CN111733219A 申請公布日 2020-10-02
分類號 C12Q1/686(2018.01)I;C12Q1/6806(2018.01)I 分類 -
發(fā)明人 張慧;張鴻;趙琨;李西清 申請（專利權）人 安徽微分基因科技有限公司
代理機構 安徽申策知識產(chǎn)權代理事務所（普通合伙） 代理人 安徽微分基因科技有限公司
地址 238000安徽省巢湖市巢湖經(jīng)濟開發(fā)區(qū)龍泉路6號未名生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)園一期南區(qū)C樓2層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及分子生物學技術領域，且公開了一種從土壤樣本中高效擴增微生物DNA的方法，包括以下步驟：步驟1、對土壤樣本進行采集；步驟2、對采集的土壤樣本進行微生物核酸提取；步驟3、對提取到的核酸進行質量檢測；步驟4、原始PCR體系與優(yōu)化后PCR體系擴增效果比對；步驟5、qPCR驗證：擴增體系中最佳牛血清蛋白(BSA)添加濃度；本發(fā)明通過采集腐殖酸、有機物、重金屬離子含量高等特殊土壤樣本，采用Spin Kit for Soil試劑盒提取成功后，PCR擴增失敗。通過優(yōu)化PCR和qPCR體系，在PCR體系中添加牛血清蛋白(BSA)并摸索最佳濃度，使擴增成功率達100％，大幅度提升了PCR擴增效率。經(jīng)驗證在PCR體系中添加牛血清蛋白(BSA)對可正常擴增的土壤樣本無影響。??