一種從人臍帶血中分離純化干細胞的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710495769.9 申請日 -
公開(公告)號 CN107034186A 公開(公告)日 2017-08-11
申請公布號 CN107034186A 申請公布日 2017-08-11
分類號 C12N5/0775(2010.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 宋國英;王曉謙;耿濤;馮凱 申請(專利權)人 洛陽中聯(lián)達盛生物科技有限公司
代理機構 北京中原華和知識產(chǎn)權代理有限責任公司 代理人 壽寧;張華輝
地址 471003 河南省洛陽市高新區(qū)春城路15號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種從人臍帶血中分離純化干細胞的方法,先將人臍帶血細胞液分離純化得到單核細胞樣本,該步驟用到的試劑盒包括試劑A和試劑B,其中試劑A為紅細胞沉淀劑,由重量分數(shù)為6%的羥乙基淀粉溶液組成;試劑B為細胞分離液,由聚蔗糖400和泛影酸葡甲胺配制而成,是一種無菌水溶液。然后進行干細胞培養(yǎng)、增殖和純化,用到的干細胞培養(yǎng)基由DMEM/F12基礎培養(yǎng)基和優(yōu)化的添加劑混合而成。本發(fā)明利用臍血干細胞體外培養(yǎng)以及在細胞培養(yǎng)基中添加組分,促進了間充質(zhì)干細胞的增殖優(yōu)勢,排擠其他細胞生長,使干細胞自然純化。單核細胞回收率≥95%,干細胞存活率≥98%,間充質(zhì)干細胞數(shù)量≥5×107,達到了臨床治療的質(zhì)量要求。