一種新型腺病毒包裝方法在CRISPR/Cas9基因編輯方法中的應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910327804.5 申請日 -
公開（公告）號 CN110055278A 公開（公告）日 2019-07-26
申請公布號 CN110055278A 申請公布日 2019-07-26
分類號 C12N15/861;C12N15/65;C12N15/90;C12N7/01 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姬廣聚;楊智廣;顧磊;王會文;黃雪;黃海軍;李靜 申請（專利權）人 中科廣聚（北京）生物醫(yī)學技術中心有限公司
代理機構 北京悅和知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 田昕
地址 100039 北京市海淀區(qū)永定路乙1號院1號樓三層3018
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實施例涉及生物技術領域，具體涉及一種新型腺病毒包裝方法在CRISPR/Cas9基因編輯方法中的應用。本發(fā)明提供的腺病毒包裝方法采用在體外進行連接的方法得到重組載體，避免了傳統(tǒng)pAdEasy系統(tǒng)使用電轉法使pAdEasy和穿梭質粒在細菌內(nèi)發(fā)生同源重組的步驟，步驟簡單，成功率高，且節(jié)省了腺病毒包裝的時間，包裝效率高，省時高效。本發(fā)明針對CRISPR/Cas9技術，設計了可用于新型腺病毒包裝方法的pBlue?DsRed?Cas9和pBlue?EGFP?sgRNA等載體。對不同基因進行編輯時，只需改變pBlue?EGFP?sgRNA載體中sgRNA序列，pBlue?DsRed?Cas9載體可作為通用載體用于不同基因的編輯。本發(fā)明提供的新型腺病毒包裝方法包裝得到的腺病毒，用于CRISPR/Cas9技術，基因編輯效率高。