一種用于檢測(cè)EML4-ALK、ROS1和RET融合基因突變的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810001999.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108103175B 公開（公告）日 2021-09-17
申請(qǐng)公布號(hào) CN108103175B 申請(qǐng)公布日 2021-09-17
分類號(hào) C12Q1/6869;C12N15/11 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡春旭;陸思嘉;任軍 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 序康醫(yī)療科技（蘇州）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 鞏克棟
地址 215000 江蘇省蘇州市工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園B7樓201單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種通過文庫構(gòu)建并測(cè)序一次性檢測(cè)EML4?ALK，ROS1和RET融合基因突變的方法。本發(fā)明能在3小時(shí)內(nèi),由1?2000個(gè)新鮮組織細(xì)胞，10pg?20ng經(jīng)提取的總RNA，或血漿游離RNA為起始，在ALK,ROS1,RET特異性引物與逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下對(duì)其中包含融合型信息的mRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄并獲得cDNA第一鏈，而后以模板轉(zhuǎn)換技術(shù)在cDNA的3’端添加一段接頭序列(帶有分子標(biāo)簽)并進(jìn)行cDNA二鏈生成，而后以接頭區(qū)段為引物錨定位點(diǎn)進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增的同時(shí)在cDNA兩端加上Illumina文庫接頭，以獲得符合下游分析要求的高質(zhì)量cDNA文庫。