一種Nucyep的編碼基因、重組表達載體、重組工程菌及其制備方法和應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811245986.3 申請日 -
公開（公告）號 CN109337887B 公開（公告）日 2021-04-27
申請公布號 CN109337887B 申請公布日 2021-04-27
分類號 C12N9/22;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/34 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 葛燕;王輅;李端華;趙晨;李進軍;劉濤 申請（專利權(quán)）人 中國醫(yī)藥集團總公司四川抗菌素工業(yè)研究所
代理機構(gòu) 成都頂峰專利事務所（普通合伙） 代理人 李林
地址 610000 四川省成都市外東十陵鎮(zhèn)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領域，具體涉及一種Nucyep的編碼基因、重組表達載體、重組工程菌及其制備方法和應用。該重組Nucyep的編碼基因的核苷酸序列如SeqIDNo.2所示，或為與核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的基因具有90％以上同源性的基因。將所述Nucyep的編碼基因與pET?24a(+)質(zhì)粒重組構(gòu)成重組表達載體，并將該重組表達載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌Rosseta(DE3)構(gòu)成重組工程菌。本發(fā)明所述重組工程菌的優(yōu)點在于，優(yōu)化了Nucyep的編碼基因序列，使得該重組工程菌，在乳糖誘導下，僅需幾個小時即可產(chǎn)生大量目的蛋白。表達產(chǎn)物為包涵體，避免了可溶性核酸酶對宿主菌的毒性作用。且本發(fā)明提供了Nucyep包涵體的復性和純化方法，效率高，流程簡單，易于操作，更加適用于Nucyep的工業(yè)生產(chǎn)和推廣。