基于CHO細胞表達系統(tǒng)的重組人神經(jīng)生長因子純化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210206171.0 申請日 -
公開（公告）號 CN102702341A 公開（公告）日 2012-10-03
申請公布號 CN102702341A 申請公布日 2012-10-03
分類號 C07K14/48(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I 分類 有機化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 史權(quán)威;樂偉;霍立紅;李曼;劉荷中 申請（專利權(quán)）人 河北華安生物醫(yī)藥股份有限公司
代理機構(gòu) 北京兆君聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 北京華安科創(chuàng)生物技術(shù)有限公司
地址 100085 北京市海淀區(qū)上地開拓路5號A409
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及“基于CHO細胞表達系統(tǒng)的重組人神經(jīng)生長因子純化方法”，包括如下步驟：1）將上清先后離心去除活細胞、細胞碎片，過濾去除雜質(zhì)和細菌；2）上清上樣于EMD SO3-（M）層析柱，沖洗未結(jié)合蛋白以及雜質(zhì)蛋白，洗脫，收集目的蛋白峰；用截留分子量為3K的超濾設(shè)備濃縮蛋白，4）上樣于含Superdex 75層析柱，收集目的蛋白峰，即為重組人神經(jīng)生長因子原液。本發(fā)明的表達系統(tǒng)和方法可以制備純度大于98％，比活性高于5×105AU/mg的重組人神經(jīng)生長因子。本發(fā)明與其他方法相比減少了操作步驟，大大縮短了生產(chǎn)周期，提高了處理量和得率，適合規(guī)?；a(chǎn)。