基于CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子純化方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201210206171.0 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN102702341B 公開(公告)日 2014-01-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN102702341B 申請(qǐng)公布日 2014-01-22
分類號(hào) C07K14/48(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 史權(quán)威;樂偉;霍立紅;李曼;劉荷中 申請(qǐng)(專利權(quán))人 河北華安生物醫(yī)藥股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京兆君聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 北京華安科創(chuàng)生物技術(shù)有限公司
地址 100085 北京市海淀區(qū)上地開拓路5號(hào)A409
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及“基于CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子純化方法”,包括如下步驟:1)將上清先后離心去除活細(xì)胞、細(xì)胞碎片,過濾去除雜質(zhì)和細(xì)菌;2)上清上樣于EMD SO3-(M)層析柱,沖洗未結(jié)合蛋白以及雜質(zhì)蛋白,洗脫,收集目的蛋白峰;用截留分子量為3K的超濾設(shè)備濃縮蛋白,4)上樣于含Superdex 75層析柱,收集目的蛋白峰,即為重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子原液。本發(fā)明的表達(dá)系統(tǒng)和方法可以制備純度大于98%,比活性高于5×105AU/mg的重組人神經(jīng)生長(zhǎng)因子。本發(fā)明與其他方法相比減少了操作步驟,大大縮短了生產(chǎn)周期,提高了處理量和得率,適合規(guī)?;a(chǎn)。