一種突變酶SHP2 E76K的活性檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011600458.2 申請日 -
公開（公告）號 CN113155787A 公開（公告）日 2021-07-23
申請公布號 CN113155787A 申請公布日 2021-07-23
分類號 G01N21/64;G01N1/38 分類 測量；測試;
發(fā)明人 石榴;徐燕華 申請（專利權）人 武漢合研生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機構 上海精晟知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 張仁杰
地址 430000 湖北省武漢市東湖新技術開發(fā)區(qū)高新大道666號生物創(chuàng)新園B1棟二樓B274-12室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種突變酶SHP2 E76K的活性檢測方法，通過以下步驟，化合物配制添加，SHP2 E76K酶添加、底物添加、總體系反應和化合物本底讀值檢測，其中SHP2 E76K酶添加，用1X assay buffer將SHP2 E76K酶稀釋到2ng/uL，取2uL每孔加入到對應孔中，化合物與酶在相應溫度下進行預孵育，化合物預孵育的溫度為20?30度，且孵育時間為30?90分鐘，可以直接建立了SHP2蛋白突變型SHP2（E76K）的酶活檢測方法，為藥物在此靶點上的抑制作用檢測提供了方法，直接檢測化合物與酶的抑制作用，可快速篩選出有效果的化合物，快速推進藥物的研發(fā)進度，本發(fā)明涉及SHP2 E76K活性檢測技術領域。該突變酶SHP2 E76K的活性檢測方法，解決現(xiàn)有技術中耗費大量時間及資金且細胞實驗存在一些不穩(wěn)定因素問題。