一種適用于單鏈DNA的高通量測序文庫構建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811073055.X 申請日 -
公開（公告）號 CN110904512A 公開（公告）日 2020-03-24
申請公布號 CN110904512A 申請公布日 2020-03-24
分類號 C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6886 分類 組合技術〔8〕;
發(fā)明人 李志隆;汪宇盈;葉明芝;葉李莉;劉繼龍;宋炎;陳雙雙 申請（專利權）人 天津華大醫(yī)學檢驗所有限公司
代理機構 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 廣州華大基因醫(yī)學檢驗所有限公司;深圳華大基因股份有限公司;深圳華大臨床檢驗中心;天津華大醫(yī)學檢驗所有限公司;華大數(shù)極生物科技（深圳）有限公司
地址 510006 廣東省廣州市番禺區(qū)小谷圍街中二橫路22號A305房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種適用于單鏈DNA的高通量測序文庫構建方法。本發(fā)明方法包括：將單鏈模板與帶有簡并堿基的雙鏈接頭1相連(帶有簡并堿基的特殊接頭使單鏈模板與雙鏈接頭連接成為可能，雙鏈接頭可隨機地結合到單鏈模板上，使接頭序列與模板充分靠近，再使用T4 DNA連接酶完成連接)；采用延伸引物進行延伸，得到雙鏈產(chǎn)物；將雙鏈產(chǎn)物與接頭2相連；以所得連接產(chǎn)物為模板，進行PCR擴增，獲得所需文庫。本發(fā)明可用于構建高通量測序文庫，且可用于單鏈DNA文庫構建，本發(fā)明將提高高通量測序文庫構建中單鏈DNA利用率，進一步實現(xiàn)低起始量建庫的目的，在未來腫瘤早篩和預后監(jiān)測應用中發(fā)揮關鍵作用。