一種脫堿基核酸內(nèi)切酶1的熒光檢測探針、試劑盒及應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811313151.7 申請日 -
公開（公告）號 CN109439735B 公開（公告）日 2021-07-30
申請公布號 CN109439735B 申請公布日 2021-07-30
分類號 C12Q1/6851（2018.01）I;C12N15/11（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙美萍;王嘉禹;盧鵬;李夢圓 申請（專利權(quán)）人 江蘇集萃分子工程研究院有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京萬象新悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 李稚婷
地址 215500江蘇省蘇州市常熟市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)賢士路88號6-7幢202
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種脫堿基核酸內(nèi)切酶1的熒光檢測探針、試劑盒及其應(yīng)用。所述探針為DNA/RNA雜合探針，其中DNA鏈上帶有一脫堿基位點(diǎn)，該脫堿基位點(diǎn)的5’側(cè)為G堿基，3’側(cè)連續(xù)存在兩個(gè)錯(cuò)配堿基，形成一懸出區(qū)；在懸出區(qū)兩側(cè)的DNA鏈上分別標(biāo)記有熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)。APE1可以識(shí)別和切割該DNA鏈上脫堿基位點(diǎn)5’方向的磷酸酯鍵，將DNA鏈一分為二，從而使熒光基團(tuán)發(fā)出熒光信號，實(shí)現(xiàn)在復(fù)雜的生物樣品環(huán)境中對APE1含量的直接檢測。相比于現(xiàn)有的熒光分析方法，本發(fā)明在探針結(jié)構(gòu)和反應(yīng)溶液配方上都有重大改進(jìn)，靈敏度更高，檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠，而且試劑成本更低，穩(wěn)定性更好。