一種含WSB1基因啟動子和報告基因的重組質(zhì)粒及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811610951.5 申請日 -
公開（公告）號 CN109576297B 公開（公告）日 2022-06-24
申請公布號 CN109576297B 申請公布日 2022-06-24
分類號 C12N15/63;C12N15/65;C12Q1/66;C12Q1/02 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周利紅;李琦;馮煜;伏杰;隋華;王炎;季青;馮媛媛;劉寧寧;呼雪慶 申請（專利權(quán)）人 上海中醫(yī)藥大學附屬曙光醫(yī)院
代理機構(gòu) 上海卓陽知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 周春洪
地址 200021 上海市黃浦區(qū)普安路185號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種含WSB1基因啟動子和報告基因的重組質(zhì)粒及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。具體地，克隆WSB1基因啟動子特異性序列，重組到含螢火蟲熒光素酶報告基因載體序列中，構(gòu)建含WSB1基因啟動子和報告基因的重組質(zhì)粒，再將構(gòu)建的重組質(zhì)粒與海腎熒光素酶報告基因質(zhì)粒pRL?TK共轉(zhuǎn)染腫瘤細胞，使其穩(wěn)定表達，最后通過檢測雙熒光素酶的活性來反映WSB1基因啟動子啟動轉(zhuǎn)錄的活性，從而應(yīng)用于靶向篩選抗腫瘤藥物。本發(fā)明構(gòu)建的重組質(zhì)粒采用的是WSB1基因啟動子，并選取了特定的啟動子序列，所構(gòu)建的藥物篩選模型具有高特異性、高靈敏度和高準確度，實現(xiàn)了以WSB1為靶點的抗腫瘤藥物的高通量篩選。