（R）-ω-轉(zhuǎn)氨酶突變體及其在制備西他列汀中間體中的應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010273326.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN111534494B 公開(kāi)（公告）日 2021-10-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN111534494B 申請(qǐng)公布日 2021-10-01
分類號(hào) C12N9/10（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12P17/10（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 柳志強(qiáng);彭晨;賈東旭;李軍良;程峰;張曉健;鄭裕國(guó);何人寶;金逸中;林嬌華 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 浙江永太藥業(yè)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州之江專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 牛世靜
地址 310014浙江省杭州市下城區(qū)潮王路18號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種（R）?ω?轉(zhuǎn)氨酶突變體及其在制備西他列汀中間體中的應(yīng)用，該突變體由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第77位的精氨酸、第181位的亮氨酸、第130位的精氨酸、第139位的酪氨酸和第273位蘇氨酸經(jīng)多點(diǎn)突變得到。本發(fā)明通過(guò)基因挖掘技術(shù)篩選新型的（R）?ω?TA重組酶，并通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù)進(jìn)行分子改造，獲得了高酶活、高底物耐受性和高立體選擇性的（R）?ω?TA突變體催化劑，該突變體能夠以前體酮類似物1?（吡咯烷?1?基）?4?（2,4,5?三氟苯基）?1,3?丁二酮為底物不對(duì)稱催化合成西他列汀中間體（R）?3?氨基?1?（吡咯烷?1?基）?4?（2,4,5?三氟苯基）丁?1?酮，且轉(zhuǎn)化率較高，最高可達(dá)到94.6％。